Abstracts
Résumé
L’épidémie mondiale de syndrome métabolique - défauts des métabolismes glucidique et lipidique, obésité abdominale, dyslipidémie et hypertension, risques d’obésité, de diabète de type 2 et de maladie cardiovasculaire - reflète la diversité des influences géoclimatiques et culturelles subies par les populations concernées et le caractère soudain des changements (alimentation pléthorique et/ou déséquilibrée, sédentarisation). Outre l’héritage progressif d’un « génotype économe », accumulé au cours de siècles ponctués par les famines, les individus des générations actuelles ont subi des altérations de leur programmation épigénétique, d’une part au cours de leur développement foetal et postnatal, en liaison avec une nutrition déséquilibrée et des désordres métaboliques maternels et, d’autre part, au cours de leur vie, en liaison avec leurs excès alimentaires et l’insuffisance de leur activité physique. Afin de convertir ce « phénotype économe », aujourd’hui devenu obsolète, en un « phénotype gaspilleur », il faut identifier les séquences concernées - gènes, soumis à empreinte ou non, ou transposons, procéder au décryptage des signaux épigénétiques en cause, de leur verrouillage ou de leur labilité, puis identifier ou concevoir des molécules (nutriments et médicaments) capables de prévenir (ou de modifier) un formatage épigénétique aberrant et inadapté.
Summary
The importance of epigenetic alterations has been acknowledged in cancer for about two decades by an increasing number of molecular oncologists who contributed to deciphering the epigenetic codes and machinery and opened the road for a new generation of drugs now in clinical trials. However, the relevance of epigenetics to common diseases such as metabolic syndrome and cardiovascular disease was less conspicuous. This review focuses on converging data supporting the hypothesis that, in addition to « thrifty genotype » inheritance, individuals with metabolic syndrome (MetS) - combining disturbances in glucose and insulin metabolism, excess of predominantly abdominally distributed weight, mild dyslipidemia and hypertension, with the subsequent development of obesity, type 2 diabetes mellitus (T2D) and cardiovascular disease (CVD) - have suffered improper « epigenetic programming » during their fetal/postnatal development due to maternal inadequate nutrition and metabolic disturbances and also during their lifetime. Moreover, as seen for obesity and T2D, MetS tends to appear earlier in childhood, to be more severe from generation to generation and to affect more pregnant women. Thus, in addition to maternal effects, MetS patients may display « transgenerational effects » via the incomplete erasure of epigenetic marks endured by their parents and grandparents. We highlight the susceptibility of epigenetic mechanisms controlling gene expression to environmental influences due to their inherent malleability, emphasizing the participation of transposable elements and the potential role of imprinted genes during critical time windows in epigenetic programming, from the very beginning of development throughout life. Increasing our understanding on epigenetic patterns significance and small molecules (nutrients, drugs) that reverse epigenetic (in)activation should provide us with the means to « unlock » silenced (enhanced) genes, and to « convert » the obsolete human thrifty genotype into a « squandering » phenotype.
Article body
L’épidémie de syndrome métabolique
Le syndrome métabolique comprend un ensemble de troubles métaboliques incluant une résistance à l’insuline, une diminution du HDL-cholestérol, une hypertriglycéridémie, un surpoids abdominal, associés à une hypertension, un état inflammatoire et un état thrombotique. Les complications du syndrome métabolique (obésité, diabète de type 2 [DM2], maladies cardiovasculaires et cancers) ont un impact de plus en plus préoccupant sur la santé publique [1]. Depuis plus d’une décennie, la notion que ce type de maladies prend ses racines au cours de périodes cruciales de la programmation foetale et postnatale est largement étayée [2].
Une proportion grandissante de femmes (14 % à 27 %) débutent leur grossesse en état de surcharge pondérale. Si les effets du diabète gestationnel ont été bien étudiés, les effets sur la « programmation foetale » d’un syndrome métabolique chez la mère, associé à une alimentation déséquilibrée et à des troubles métaboliques, sont encore largement méconnus [3]. Par ailleurs, en cas de petit poids de naissance, une croissance postnatale précoce rapide (catch-up growth) peut être délétère, et il semble bien que l’effet le plus délétère (poids et longévité) soit consécutif à une trajectoire de croissance chaotique [4].
Une revue récente établit un bilan critique des travaux réalisés, essentiellement chez l’animal, sur l’étude de la « programmation foetale » [5]. Si la majorité des travaux ont porté sur l’étude des conséquences d’une restriction protéique pendant la gestation, ce sont pourtant les études s’intéressant aux effets d’un régime hypergras et/ou riche en hydrates de carbone qui, bien que moins nombreuses, semblent correspondre le mieux aux caractéristiques de l’épidémie actuelle de syndrome métabolique.
Régulation de l’expression génique par les modifications épigénétiques
Tous nos tissus contiennent les mêmes 30 000 gènes et pourtant, dans un tissu donné et à un stade donné, tous ne s’expriment pas : un « code épigénétique » permet à certains gènes d’être actifs (plus ou moins), alors que d’autres restent silencieux, de manière transitoire ou permanente ((→) m/s 2005, n° 4, p. 384 et 390).
Le code épigénétique comprend plusieurs strates interconnectées et interdépendantes : le code de la méthylation de l’ADN, le code des histones (acétylation, méthylation, phosphorylation…) et celui des co-activateurs et co-répresseurs. Ces codes sont mis en place et interprétés par une machinerie complexe d’enzymes et de co-facteurs qui assurent un remodelage adéquat de la chromatine autour des gènes et son accessibilité aux facteurs de transcription. Chez l’adulte, la modification des profils de méthylation de l’ADN au cours des processus de différenciation n’ont été décrits à ce jour que pour quelques gènes, mais il est clair que ce type de processus s’applique nécessairement à tous les gènes contrôlés au cours du développement et de la différenciation. Ainsi, on observe une stricte corrélation entre la déméthylation du promoteur de la leptine, son expression et la différenciation du pré-adipocyte en adipocyte [6, 7].
Contrairement aux mutations dans la séquence de l’ADN qui sont irréversibles, les modifications épigénétiques sont, en principe, instables et réversibles. Elles ont ainsi un caractère transitoire dans la vie courante : au cours de la journée, l’expression des gènes est modulée par les signaux moléculaires des rythmes circadiens, ainsi que par les signaux nutritionnels, au gré de la diversité de l’ensemble des stimulus environnementaux.
Enfin, des altérations de la méthylation de l’ADN s’accumulent avec l’âge, qui peuvent rendre compte de l’accentuation des symptômes du syndrome métabolique chez les individus âgés [3]. Des études menées chez la souris ApoE-/-, génétiquement prédisposée à l’athérosclérose, montrent que des profils épigénétiques anormaux sont détectables dans l’aorte bien avant l’apparition de lésions vasculaires détectables [8]. De plus, les altérations de la méthylation de l’ADN sont accentuées si les souris ApoE-/- sont alimentées avec un régime de type occidental, ou « caféteria » [9].
Programmation épigénétique au cours du développement foetoplacentaire et postnatal
En réponse à des programmes génétiques et épigénétiques orchestrés avec précision, les tissus et les organes sont façonnés, alternant prolifération, différenciation et apoptose. Plusieurs exemples de régulation épigénétique en relation avec le statut nutritionnel au cours de la vie utérine ou de la période postnatale ont ainsi été mis en évidence.
Les défauts de croissance foetoplacentaire sont associés à des altérations épigénétiques chez le rat. Au niveau du foie, par exemple, on observe une altération de la méthylation de l’ADN (hypométhylation) et de l’acétylation des histones en relation avec des modifications du métabolisme hépatique monocarboné de la voie des folates-méthionine [10] (Figure 1). L’inadéquation entre les apports (qualitatifs et quantitatifs) de nutriments ou de métabolites et les besoins précis de ces processus, au décours de l’espace/temps limité qui leur est dévolu, peut aboutir à des altérations des processus homéostasiques liées à des modifications épigénétiques instables et potentiellement réversibles, mais aussi à une situation de « non-retour » due à des altérations irréversibles des processus de différenciation et d’organogenèse, avec un développement structurel et fonctionnel anormal, voire une absence de certains types cellulaires spécialisés.
Par ailleurs, la leptine, qui contrôle l’équilibre énergétique par la modulation électrophysiologique des neurones responsables de la régulation positive (NPY/AgRP, neuropeptide Y/Agouti related protein) ou négative (POMC/CART, pro-opiomélanocortine/cocaine- and amphetamine-regulated transcript ; αMSH, melanocyte-stimulating hormoneα) de la prise alimentaire, a également un rôle trophique sur certains neurones de l’hypothalamus impliqués dans la réponse aux aliments, et contribue à leur plasticité. Cependant, ce rôle primordial ne s’exerce que pendant une fenêtre très étroite de la période néonatale ; au-delà de ces limites, la maturation non achevée est irrécupérable [11].
Enfin, le taux d’apoptose pancréatique physiologique en période postnatale est augmenté chez les rats dont la mère a subi une restriction protéique durant la gestation, ce qui entraîne une diminution de la masse de cellules β du pancréas et perturbe, à la génération suivante, l’adaptation du pancréas endocrine [12]. De même, bien qu’il ne s’agisse plus d’une restriction, l’altération des fonctions pancréatiques (comme l’hyperinsulinisme) consécutive à un régime riche en hydrates de carbones se répercute sur le développement du pancréas à la deuxième génération, en dehors de tout stimulus nutritionnel délétère [13]. Il est néanmoins particulièrement intrigant de constater que des causes diamétralement opposées, sous-nutrition par une restriction protéique foetale et/ou postnatale ou surnutrition par un régime riche en hydrates de carbones ou en graisses, qui se traduisent par une diminution des flux sanguins foetoplacentaires et compromettent la croissance de l’embryon, aient les mêmes conséquences à long terme.
Un état épigénomique particulier peut également être mis en place par une programmation comportementale pendant une étroite fenêtre, et être potentiellement réversible. Ainsi, une augmentation des soins maternels à des rats nouveau-nés se traduit par une meilleure réponse au stress à l’âge adulte. L’équipe de Michael Meaney a récemment démontré que la méthylation du promoteur du gène du récepteur des glucocorticoïdes (RG) dans l’hippocampe est différente entre les petits de mères prodigant un bon niveau de soins maternels (mères HLG, high licking-grooming) et les petits de mères LLG (low licking-grooming) [14]. Ces différences apparaissent dès la première semaine de vie, avec une déméthylation caractéristique pour les petits de mères HLG. Elles persistent jusqu’à l’âge adulte et sont associées à une modification de l’acétylation des histones et à une augmentation du facteur de transcription NGFI-A (nerve growth factor-inducible protein A), qui se fixe sur le RG, avec pour résultat une augmentation de l’expression du récepteur. Ces modifications épigénétiques ne sont pas toujours totalement verrouillées. Ainsi, une injection au niveau central de trichostatine A, un inhibiteur d’histone désacétylase (HDAC), efface les différences épigénétiques entre les groupes d’animaux et supprime ainsi, chez l’adulte, les conséquences d’un comportement maternel postnatal inadéquat [14].
Gènes soumis à empreinte et croissance foetoplacentaire et postnatale
Les gènes soumis à empreinte parentale sont caractérisés par une expression mono-allélique : seul l’allèle paternel ou maternel s’exprime. L’autre allèle, intact, est « éteint » par des modifications épigénétiques. L’apposition du sceau parental a lieu au cours de la gamétogenèse. La complexité de la régulation au niveau des domaines soumis à empreinte, comportant à la fois des gènes à expression maternelle et des gènes à expression paternelle, peut les rendre particulièrement sensibles aux facteurs environnementaux et aux nutriments.
L’empreinte parentale ((→) m/s 2005, n° 4, p. 390) est rarement un phénomène de tout ou rien. L’expression mono-allélique des gènes soumis à empreinte parentale varie en effet d’un individu à l’autre et, pour un même individu, d’un tissu à l’autre, ainsi qu’au cours de l’embryogenèse, du développement et du vieillissement, voire dans certaines situations pathologiques comme le cancer ou l’athérosclérose. Ainsi, les modifications épigénétiques associées à l’empreinte pourraient se comporter comme un système tampon, une sorte de rhéostat, permettant une adaptation rapide aux conditions environnementales, grâce aux gènes s’exprimant de façon mono-allélique, en leur imposant le silence (allèle actif) ou, à l’inverse, en réactivant leur expression (allèle inactif) [15-18].
Nous n’avons pas encore la preuve formelle de l’implication de gènes soumis à empreinte parentale dans les processus d’adaptation de l’espèce à son environnement, mais un faisceau d’arguments vient étayer cette hypothèse (Encadré).
Gènes soumis à empreinte et croissance foetoplacentaire : apport et demande en nutriments
En accord avec la théorie du conflit entre les sexes, plusieurs gènes à expression maternelle contrôlent négativement la croissance foetale et placentaire, alors que plusieurs gènes à expression paternelle les contrôlent positivement (Figure 3). Grâce à des gènes soumis à empreinte appartenant aux familles de gènes active aminoacid transport system A, solute carrier ou organic cation transporter, l’empreinte parentale intervient dans la capacité de transport des nutriments, dans la régulation des interactions entre différents types cellulaires au niveau des interfaces foetomaternelles et contribue à la croissance du placenta et à sa résistance vasculaire, en contrôlant l’apport en nutriments. Dans les organes foetaux, les gènes soumis à empreinte contrôlent la demande en nutriments en réglant le taux de croissance des tissus foetaux [25] (Figure 3A).
Dans le placenta, la régulation de l’expression des gènes implique majoritairement une méthylation des histones qui semble indépendante de la méthylation de l’ADN [26]. Celle-ci est d’ailleurs réduite dans le placenta par rapport aux tissus somatiques (Figure 2), ce qui pourrait rendre compte d’une plus grande labilité épigénétique aux facteurs environnementaux des gènes placentaires soumis à empreinte.
Gènes soumis à empreinte et croissance postnatale
Les gènes soumis à empreinte parentale jouent également un rôle crucial pendant la période postnatale. Les deux exemples rapportés plus loin, concernant le complexe GNAS et les gènes Peg1 et Peg3, décrivent des mécanismes de solidarité entre les générations pouvant être mis en jeu face à l’abondance ou à la pénurie alimentaire [16] (Figure 3B).
Le complexe GNAS est un domaine soumis à empreinte codant, d’une part, pour le peptide stimulant la protéine Gsα (sous-unité régulatrice des protéines G stimulatrices), qui interagit avec l’adénylate cyclase, et, d’autre part, pour de nombreux autres transcrits s’exprimant de manière spécifique de tissu, soit à partir de l’allèle maternel (gonades, hypophyse, thyroïde, tubule proximal rénal et tissu adipeux), soit à partir de l’allèle paternel (tissu adipeux brun). Les phénotypes murins et humains associés à des altérations de ce locus montrent des effets opposés pour les pertes de fonction paternelle (diminution de l’adiposité, hypoglycémie, hypermétabolique, diminution de l’activité locomotrice, résistance à l’hormone parathyroïde) et maternelle (augmentation de l’adiposité). Les souriceaux ayant hérité de la délétion paternelle de l’isoforme extralarge de Gsα (Xlαs) ont des difficultés à têter, une hypoglycémie néonatale et une réduction du tissu adipeux brun. En revanche, la transmission maternelle est bénigne, le transcrit de cette isoforme n’étant pas produit à partir du chromosome maternel [21]. La régulation de l’homéostasie énergétique est également perturbée chez ces souriceaux. Les concentrations sanguines de glucose, d’insuline et de glucagon sont fortement diminuées, suggérant un dysfonctionnement pancréatique. La masse graisseuse interscapulaire, essentiellement composée de tissu adipeux brun, est considérablement réduite et montre une absence de particules lipidiques [21]. Enfin, les régions cérébrales exprimant l’isoforme Xlαs correspondent aux régions de contrôle de la vigilance, de l’insomnie, du sommeil et de l’homéostasie énergétique (hypothalamus), ainsi qu’à celles impliquées dans l’innervation des muscles des mâchoires. Ces régions d’expression sont à rapprocher du phénotype des souris invalidées : hypoactivité, difficultés à têter et troubles métaboliques. Ainsi, les souris n’exprimant plus Xlαs sont hypermétaboliques et maigres, et ont une sensibilité accrue à l’insuline. Ces résultats montrent que le complexe Gnas joue un rôle crucial dans l’adaptation métabolique postnatale du nouveau-né.
Les altérations de deux autres gènes soumis à empreinte, Peg1 et Peg3, qui s’expriment à partir de l’allèle paternel, montrent comment de tels gènes peuvent contrôler chez les différents partenaires, la mère et le foetus/nourrisson, de multiples aspects du développement foetal et postnatal. L’invalidation de l’allèle paternel de Peg3 entraîne, lorsqu’elle est portée par le foetus, une diminution de la taille du placenta, de la croissance foetale, de la capacité à têter et de la croissance postnatale et, enfin, de la température corporelle, ainsi qu’un retard du sevrage et de la puberté [22]. Cette mutation de l’allèle paternel de Peg3, lorsqu’elle est portée par la mère, compromet ses chances de reproduction, avec une diminution des soins maternels, de la prise de nourriture pendant la grossesse et de la production de lait. Les conséquences en sont, à nouveau pour le nourrisson, une diminution de la croissance postnatale et un retard du sevrage et de la puberté [22]. La synchronisation de ces traits co-adaptatifs, chez la mère et les petits, permet d’assurer que le petit qui aura tiré le maximum de sa mère sera lui-même bien approvisionné en nutriments, rendant les souriceaux femelles ainsi capables d’être à leur tour de « bonnes » mères apportant à leurs petits les meilleurs soins [22].
Par ailleurs, chez l’adulte, l’expression de Peg3 dans le tissu adipeux, ainsi que celle d’un autre gène soumis à empreinte parentale, Peg1, est fortement augmentée dans l’obésité induite par le régime alimentaire [27], et corrélée à la taille des adipocytes [28] : ce gène à expression paternelle pourrait donc favoriser la mise en réserve d’énergie.
Cependant, la démonstration formelle de l’implication des gènes soumis à empreinte dans les processus d’adaptation doit reposer sur une analyse détaillée des profils épigénétiques dans les régions clés des complexes de gènes soumis à empreinte parentale. En effet, l’augmentation ou la diminution de l’expression d’un gène soumis à empreinte parentale peut être attribuée soit à la variation de l’expression de l’allèle parental qui s’exprime normalement sans intervention de l’autre allèle, soit à une perte d’empreinte avec altération de région(s) différentiellement méthylée(s) (DMR) et expression (ou extinction) des deux allèles. Ce type d’analyse devrait permettre de discriminer ces deux possibilités, afin de montrer si ces états d’empreinte parentale altérés sont transmissibles à la génération suivante.
Effets transgénérationnels et adaptation
Une modification nutritionnelle pendant la période de lactation (lait riche en hydrates de carbone) peut entraîner la transmission à la seconde génération de l’hyper-insulinisme, phénotype acquis à la première génération [13]. Chez l’homme, des données épidémiologiques suédoises vont dans ce sens : un grand-père « bien nourri » pendant sa période prépubertaire « transmet » à ses petits-enfants un risque multiplié par 4 de développer un diabète de type 2 [29] (Figure 2). Enfin, la programmation par le comportement maternel persiste bien à l’âge adulte, et montre un effet transgénérationnel, puisqu’à leur tour les femelles « bien maternées » deviennent elles-mêmes de bonnes mères [14].
Les transposons et les gènes soumis à empreinte parentale pourraient être les supports épigénétiques des altérations transmises aux générations suivantes par des « effets transgénérationnels » [23, 30] (Figure 2). Un mécanisme épigénétique rendant compte de tels effets a été décrit sur les locus Agouti (A) et Axin. Chez le mutant Agouti viable yellow Avy, les changements de coloration du pelage et d’autres aspects phénotypiques (hyper-insulinisme, obésité, tumeurs) dépendent de la méthylation d’une séquence transposable IAP (intracisternal A particle) insérée à proximité du gène A. À la génération suivante, les phénotypes variables observés dans la descendance sont dus à l’effaçage incomplet de la modification épigénétique lorsque l’allèle Avy est transmis à travers la lignée germinale maternelle. Le même phénomène se produit pour la séquence IAP insérée dans le locus Axin, et montre que la transmission paternelle ou maternelle dépend du fond génétique [23]. Enfin, un régime riche en donneurs de méthyl pendant la gestation se traduit par une augmentation de la proportion des petits porteurs de séquences IAP méthylées.
Bien qu’aucun mécanisme analogue n’ait encore été décrit chez l’homme, mais en considérant qu’une importante proportion du génome humain est représentée par des transposons (> 40 %), on ne peut négliger l’impact substantiel, en termes de santé publique, des influences nutritionnelles précoces sur ces séquences.
Conclusions
L’objectif des recherches en cours est d’identifier les gènes concernés par les altérations épigénétiques liées à la nutrition et de déchiffrer le message des différents profils épigénétiques. La labilité des modifications épigénétiques modulables par l’alimentation, observées au niveau de certains gènes, mais aussi des transposons et des gènes soumis à empreinte parentale, de même que le rôle de ces gènes soumis à empreinte parentale dans la croissance foetale, placentaire et postnatale, ainsi que dans le développement cérébral, suggèrent que les gènes soumis à empreinte parentale sont les supports les plus plausibles de ces altérations épigénétiques liées à l’adaptation de l’individu - de l’espèce - à son alimentation. Les résultats obtenus chez l’animal et les essais cliniques en cours chez l’homme dans le cadre de traitement de tumeurs (avec par exemple des chimiothérapies à base de cisplatine, budésonide ou décitabine) laissent envisager, lorsque les mécanismes épigénétiques en jeu et les fenêtres critiques auront été décryptés, de nouvelles perspectives de prévention ou de traitement (Figure 4). Compte tenu des interrelations entre les différentes voies épigénétiques, la combinaison d’un médicament avec un régime ou des nutriments appropriés pourrait être plus efficace que le médicament isolé [31].
Appendices
Remerciements
Ce travail a été soutenu financièrement par une bourse Nestlé (AV), une bourse des laboratoires Fournier-Pharma (CGK) et des subventions de l’Inra, l’Inserm (ATC-Nutrition, PRNH), l’Association française des Diabétiques et l’Institut Benjamin-Delessert.
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