FIAT véhicule de nouveaux mécanismes de contrôle transcriptionnel de la masse osseuse Inhibition of bone mass accrual by the FIAT transcriptional repressor

Les dix récentes années ont amené des percées spectaculaires dans notre compréhension de la différenciation et de la fonction de l’ostéoblaste, la cellule responsable de la formation osseuse. En particulier, l’identification et l’étude des facteurs de transcription Runx2 et Osx ont élucidé les mécanismes transcriptionnels régissant la différenciation de l’ostéoblaste et l’expression particulière des gènes qui jouent un rôle dans la fonction de ce type cellulaire [1]. Plus récemment, il est apparu que la régulation de l’activité de ces facteurs dépend notamment d’interactions protéine-protéine, comme en témoigne l’inhibition de l’activité de Runx2 par Twist‑1 et ‑2 [2]. Une compréhension globale du mécanisme de régulation transcriptionnelle de la fonction ostéoblastique appelle donc une analyse plus complète des interactions protéiques où entrent en jeu les activateurs et les répresseurs de l’expression génique dans l’ostéoblaste. Le facteur à glissière à leucines Atf4 fait également partie des déterminants majeurs de l’activité ostéoblastique [3]. Il a été démonté qu’Atf4 module la différenciation de l’ostéoblaste [3], la transcription du gène ostéocalcine [3, 4], de même que la synthèse du collagène de type I [3]. Il est évident qu’avec un tel éventail d’actions, l’activité d’Atf4 se doit d’être sous étroite surveillance. Ainsi, la demi-vie d’Atf4 est régulée par ubiquitinylation [5]. De même, son activité transcriptionnelle est modulée après sa phosphorylation par les kinases Rsk2 (ribosomal S6 kinase-2) [3] ou PKA (protein kinase A) [6]. Nous avons identifié un mécanisme additionnel de régulation de la transcription par Atf4 : son interaction avec la protéine FIAT (factor inhibiting Atf4-mediated transcription) que notre équipe a récemment découverte et analysée [7]. FIAT est exprimée dans le noyau de l’ostéoblaste [7]. Bien que l’analyse de la séquence primaire de FIAT révèle trois motifs à glissière à leucines potentiels, la protéine ne contient pas de domaine basique qui permettrait sa liaison à l’ADN. Cette particularité suggérerait que FIAT pourrait peut-être former des dimères inactifs avec des partenaires éventuels, ce qui nous a incité à rechercher de tels partenaires en utilisant le système de deux hybrides chez la levure. À partir de banques d’ADN complémentaires provenant d’ostéoblastes primaires ou de lignées ostéoblastiques, nous avons identifié cinq clones indépendants codant pour Atf4, suggérant qu’Atf4 serait une cible préférentielle d’interaction avec FIAT [7]. Cette interaction fut confirmée dans des ostéoblastes qui expriment les deux protéines de façon endogène : l’immunoprécipitation de FIAT permet de co-immunoprécipiter Atf4, et vice-versa. Les deux protéines forment donc des dimères stables dans les cellules osseuses des mammifères. La liaison de FIAT à Atf4 inhibe l’activité transcriptionnelle d’Atf4 dans des cellules en culture. Le dimère FIAT-Atf4 ne peut se lier à l’ADN, et la transcription du gène ostéocalcine régulée par Atf4 est ainsi réduite [7]. Ce mécanisme se produit-t-il aussi in vivo ? Nous avons développé des lignées de souris transgéniques exprimant FIAT de façon exclusive dans l’ostéoblaste [7]. La transcription d’ostéocalcine est inhibée chez ces souris, et l’activité de formation osseuse des ostéoblastes est réduite. Cela conduit à une diminution significative de la masse osseuse des souris transgéniques exprimant FIAT (Figure 1), et à un affaiblissement des propriétés biomécaniques des os transgéniques. Ces changements surviennent en l’absence de perturbation de l’homéostasie des minéraux ou de changements dans la résorption osseuse [7]. Nos résultats démontrent que FIAT peut exercer une fonction décisive dans la formation osseuse in vivo et l’identifient comme un nouveau régulateur transcriptionnel de l’activité ostéoblastique. Le mécanisme d’action de FIAT comprend la formation de dimères inactifs FIAT-Atf4 (Figure 2A et B), tel que nous l’avons démontré [7]. Cependant, d’autres mécanismes pourraient aussi contribuer à l’activité de FIAT. Ainsi, FIAT …